蛋白分析FAQ彙總

• • 樣品中有鹽，上質譜該怎麼辦？

  樣品中的鹽可能會干擾質譜分析，影響結果的準確性。如果樣品中含有鹽，可以採取以下方法進行處理： 1.脫鹽處理：使用脫鹽柱（如PD-10脫鹽柱）或者脫鹽離心管（如Zeba Spin脫鹽柱）將樣品中的鹽去除。這些方法透過凝膠過濾將大分子蛋白與小分子鹽離子分離，從而達到去除鹽的

• • 為什麼說蛋白質組學是後基因組學的標誌？

  蛋白質組學被認為是後基因組學的標誌，因為它關注的是基因表達和調控的下一層次，即蛋白質水平。在基因組學研究的基礎上，蛋白質組學進一步解析了基因的功能和調控機制，為深入瞭解生物體的複雜性提供了重要資訊。 基因組學的主要目標是確定生物體的基因組序列以及這些序列的組織和功能。基

• • 已知某物種的基因組全序列，如何進行蛋白質組學研究？

  在已知某物種的基因組全序列的情況下，進行蛋白質組學研究的基本步驟如下： 1.蛋白質預測和註釋：首先，需要對基因組序列進行基因預測，識別潛在的編碼蛋白質的開放閱讀框（ORFs）。這可以透過使用基因預測軟體（例如 Genscan, AUGUSTUS, FGENESH等）來完

• • 生物大分子層析（親和、離子交換）色譜的色譜柱怎麼算上樣量？載量？

  在生物大分子層析色譜中，親和色譜（Affinity Chromatography）和離子交換色譜（Ion Exchange Chromatography）是常用的分離方法。爲了獲得理想的分離效果，需要正確計算色譜柱的上樣量和載量。 1.上樣量（Sample Load）：

• • 質譜測不出來的原因有哪些？

  質譜分析可能因多種原因而無法獲得有效結果。以下是一些可能導致質譜測不出來的原因： 1.樣品製備不當：樣品製備的過程中，可能出現樣品損失、不均勻、汙染等問題，導致有效成分濃度過低或無法被檢測。 2.離子源不適配：不同型別的離子源適用於不同的樣品和分析目的。選擇不合適

• • 定量檢測單個細胞中某種蛋白質的表達量可以有哪些方法？

  定量檢測單個細胞中某種蛋白質的表達量對於瞭解細胞間的異質性及其功能具有重要意義。目前常用的定量檢測單個細胞中蛋白質表達量的方法主要有： 1.單細胞免疫熒光：單細胞免疫熒光是一種基於熒游標記抗體的方法，可以定量檢測單個細胞中特定蛋白質的表達。透過使用靶向特定蛋白質的熒游標

• • 發生修飾的蛋白，電泳跑膠兩條帶，蛋白質譜顯示兩條帶匹配上的肽段相同，怎麼看發生了什麼修飾？

  根據您的描述，電泳跑膠顯示了兩條帶，而蛋白質譜表明這兩條帶的肽段相同。這很可能意味著這兩條蛋白質帶之間存在某種翻譯後修飾（PTM，Post-Translational Modification）。 要確定具體發生了哪種翻譯後修飾，您需要進一步分析蛋白質譜資料。以下是一些

• • 為什麼蛋白質測序以酸水解為主，鹼水解為輔？

  蛋白質測序通常使用酸水解作為主要方法，鹼水解作為輔助方法，原因主要如下： 1.酸水解效率較高：相比於鹼水解，酸水解能更有效地分解蛋白質，生成肽段，因此被廣泛採用。在酸性條件下，蛋白質中的肽鍵容易被切斷，從而生成相對易於分析的肽段。 2.酸水解對氨基酸損傷較小：在鹼

• • 液相色譜儀和離子色譜儀有什麼區別？

  液相色譜儀（HPLC，High-Performance Liquid Chromatography）和離子色譜儀（IC，Ion Chromatography）都是常用的分析儀器，但它們在原理、應用和柱子材料等方面存在一些差異。 1.原理： （1）液相色譜儀：HPLC

• • 蛋白跑出來的WB是兩條條帶，請問是蛋白降解了嗎？

  當Western Blot實驗結果出現兩條條帶時，有可能是蛋白降解的結果。但也可能是由於其他原因引起的，例如以下幾種情況： 1.蛋白降解：確實，蛋白質樣品在處理、儲存或實驗過程中可能發生降解，導致多條條帶的出現。爲了減少蛋白降解的可能性，請確保在實驗過程中使用蛋白酶抑制