蛋白分析FAQ彙總
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• 對於常見組分的混合溶劑,採用色譜+質譜+光譜是否足以定性定量地對其進行表徵?
對於常見組分的混合溶劑,採用色譜、質譜和光譜方法結合是足以對其進行定性定量表徵的。這些技術都各有其優點和侷限性,但將它們結合使用可以提供更全面、更準確、更可靠的資訊。 1.色譜(如氣相色譜(GC)和液相色譜(LC)):色譜技術可以有效地將混合物中的各種組分分離。透過比較
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• 用三重四極杆掃描獲得的子離子碎裂途徑推導不出來,能不能介紹一下mass frontier這個軟體?
Mass Frontier 可以透過對已知結構的資料庫進行搜尋來推測子離子的來源,還可以透過內建的碎裂規則庫來預測可能的碎裂途徑。大致操作步驟如下: 1.匯入質譜資料:將您的三重四極杆掃描資料匯入到 Mass Frontier 中。確保所匯入的資料檔案格式與 Mass
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• 蛋白組學研究中iTRAQ技術好還是label free技術好?
在蛋白質組學研究中,iTRAQ(同位素標記相對和絕對定量)技術和Label-free(無標記)技術都是常用的定量方法。它們各自具有優缺點,適用於不同的研究需求和實驗條件。以下是這兩種技術的主要特點和比較: 1.原理: iTRAQ是一種基於同位素標籤的定量策略,透過在
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• GC-MS檢測不同樣品的某個物質相對含量時,為什麼要用這個物質的峰面積除以內標峰面積再除以樣品的質量?
在使用GC-MS對不同樣品中某個物質的相對含量進行檢測時,採用峰面積除以內標峰面積再除以樣品質量的方法可以提高定量分析的準確性和可比性,其主要原因如下: 1.校正系統響應的變化:GC-MS分析過程中,由於儀器的效能、檢測條件等因素,不同樣品之間可能存在系統響應的變化。透
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吸附色譜法是一種常用的色譜分離技術,主要用於分離具有不同極性的化合物。在設計吸附色譜分離實驗時,需要考慮以下關鍵步驟和因素: 1.選擇合適的吸附劑:根據目標分子的性質和所需分離程度,選擇合適的吸附劑。常見的吸附劑包括矽膠、活性炭、氧化鋁、膨潤土等。吸附劑的選擇需要考慮其
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• 三重四極杆定量兩個化合物,它們母離子不同,子離子相同,液相上又沒有分開,請問定量時會相互干擾嗎?
在這種情況下,兩個化合物在質譜分析中會發生相互干擾。由於它們的子離子相同,這將導致子離子峰的強度疊加,從而使得定量結果不準確。而在液相色譜上沒有成功分離這兩種化合物,因此無法利用色譜分離來消除干擾。 要解決這個問題,可以嘗試以下策略: 1.最佳化色譜條件:改變色譜
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串聯質譜(Tandem Mass Spectrometry,MS/MS)是一種質譜技術,透過兩個或多個質譜儀串聯使用,對選定的前體離子(Precursor Ion)進行進一步的碎片化和分析。串聯質譜具有高靈敏度、高選擇性和高準確度等特點,在生物醫學、環境科學、食品安全等領域具
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細菌表面展示的蛋白質數量可以透過幾種方法進行估算: 1.流式細胞術:這是一種常用的定量技術,可以用於測量細胞表面蛋白的表達量。首先,使用特異性抗體(通常是熒游標記的)來識別和結合目標蛋白。然後,透過流式細胞儀進行分析,透過測量每個細胞的熒光強度,可以估算出蛋白的表達水平
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• 怎樣從多種蛋白質中分離、純化並鑑定相對子質量在100KD的目的蛋白質A?
要從多種蛋白質中分離、純化並鑑定相對分子質量在100 kDa的目的蛋白質A,可以採用以下步驟: 1.初步分離:首先,使用鹽析法、溶劑沉澱法或pH沉澱法等方法,對蛋白質混合物進行初步分離,去除一部分不需要的蛋白質。 2.蛋白質純化:根據目的蛋白質的特性(如親水性、電
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• 請問轉膜過程中出現最右邊這樣的條帶是什麼原因,但只有一塊飄散,有時候是同一張膜部分飄散?
在轉膜過程中,如果出現類似條帶狀的飄散現象,可能有以下幾個原因: 1.膜的質量問題:膜材料的質量不均勻可能導致部分割槽域飄散。建議購買高質量的膜材料,以保證實驗結果的可靠性。 2.轉膜過程中的操作問題:操作過程中,膜的張力不均勻或貼合不緊密,可能導致部分割槽域出現
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