蛋白分析FAQ彙總
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標記定量適合分析背景較相似的樣本間的蛋白組差異,且定量資料較準確,若樣本數量小於等於8可以選擇iTRAQ,若樣本數量在8-16之間,可以選擇TMT。非標定量對樣本數和樣本背景是否相似沒有特別的限制,相比標記定量,價格也更便宜。相關服務:定量蛋白組分析
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傳統的Lable free耗時久、重複性差、資料結果可信度不高;DIA定量是新一代非標記定量技術,採用資料非依賴模式進行資料採集,在相同時間採集到更豐富的資訊,壓縮週期的同時大福度提高樣本間平行比較的重複性,資料結果可信度極高。相關服務:DIA定量蛋白質組學
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至少要進行兩次重複,否則資料說服力不強,發文章時可能會被質疑。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT, SILAC
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• 只通過蛋白定量iTRAQ技術找到的差異蛋白,可否直接認定為生物標誌物?
從結果的科學性上來說,建議一種實驗所得到的結果再用其他方法進行驗證一下,推薦使用WB/MRM/PRM技術進行驗證。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT, SILAC
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• 知道蛋白的氨基酸序列,可否用MRM技術代替WB對其進行定性定量?
有目標蛋白的序列資訊,可以用MRM替代WB技術進行目標蛋白的精確定性定量分析。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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一般情況下,MRM可同時檢測200對transition,大概20-40個蛋白,但實際還要看蛋白樣品的丰度以及複雜程度等。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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進行MRM必須明確知道目標蛋白質,並獲得蛋白質的全序列。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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有基因組資訊一般都會有預測的蛋白序列庫,也可以根據基因組資訊先翻譯成氨基酸序列再進行MRM。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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母離子對是透過LC-MS/MS產生的譜相簿篩選經軟體設定再透過實驗最佳化獲得的。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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一個子離子可能對應多個母離子,可以透過MRM的全譜掃描分析出子離子唯一對應的母離子。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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