蛋白分析FAQ彙總
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這種情況可以考慮進樣針是否損壞、載氣流速是否太低、樣品濃度是否太低或者樣品是否被柱或進樣器襯套吸附。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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如果先後進入離子掃描通道的碎片離子分子量單位一樣或相差很小,碰裝室裏的上一個碎片離子來不及清除,就會與下一個碎片離子產生互動影響。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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1、可以考慮選擇特異的碎片離子;2、適當增加前後掃描之間的時間間隔; 3、還可以設定額外的離子掃描通道。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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iTRAQ的定量重複性是指同樣的樣本在不同的上機檢測時得到的結果是否一致。一般得分較低或比值較靠後的蛋白纔會出現嚴重的定量偏差,絕大部分的蛋白比值趨勢是一致的。一般來說,由於質譜選取肽段的隨機性,可能導致檢測到的肽段及其強度不同,在經過軟體匹配分析後,得相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-i
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• 用不同的檢索資料庫分析iTRAQ定量資料為什麼得到的元件比值不同?
使用不同資料庫檢索iTRAQ資料,可能會出現由於肽段匹配情況不同導致的些許定量結果差異,但是總體變化趨勢應是一致的。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT, SILAC
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LC-MS是定量鑑定,若要進行定性鑑定,需要在蛋白定量後各取相同量的蛋白進行還原化和烷基化。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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答案是肯定的,要求至少提供50ug蛋白,濃度不低於5ug/ul。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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• 蛋白互作技術IP、Co-IP、pull down有什麼區別?
IP(免疫沉澱):利用抗體去特異性結合抗原(樣品中的目標蛋白),以尋找或驗證與抗體有相互作用的蛋白、純化富集目的蛋白的;Co-IP(免疫共沉澱):利用抗體去識別並結合兩個相互作用的蛋白,可以驗證兩種已知蛋白是否存在相互作用,或者驗證在樣品總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白;Pull
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一般主要觀察可信度(Total Ion Score)和蛋白比值兩個引數。 相關服務:蛋白質質譜鑑定
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一般可信度在80%以上就認為可信度較高,資料可用,可信度越高資料一般就越準確,重複性越高。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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