蛋白分析FAQ彙總
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橫向條紋可能是由於樣本中含有雜質,或者聚焦不完全和聚焦過度導致的。相關服務:二維凝膠電泳服務
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• 等電聚焦電泳或聚丙烯凝膠電泳為什麼有一條藍色的條帶隨電泳移動,而顏逐漸變黃?
這是因為樣本中加了顏色指示劑——溴酚藍,溴酚藍在酸性條件下呈黃色,鹼性條件下呈藍色,透過溴芬蘭的顏色和移動的效果可以初步判斷電泳效果的好壞。相關服務:1D SDS-PAGE和IEF服務
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• 利用SILAC穩定同位素標記細胞後,多長時間可以提取細胞蛋白進行後續質譜鑑定?
SILAC為體內標記,其隨著細胞增殖對蛋白進行標記,通常需要將細胞培養並傳代至5-6代,再提取細胞蛋白進行質譜分析。相關服務:基於SILAC/Dimethyl標記的定量蛋白組分析
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目前常用的蛋白質、多肽空間結構研究方法主要有X-ray晶體衍射技術、核磁共振技術和圓二色譜技術等。 相關服務:蛋白質結構鑑定
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評估CD譜資料好壞最主要的引數是吸收譜,若吸收值在0.5-2.0之間,則表明資料可信度較高。相關服務:蛋白質圓二色譜分析
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蛋白質的純度和精確濃度是分析二級結構的關鍵,一般要求樣品純度不低於90%,且不能含有任何保護劑或其它含有光吸收的雜質;樣品濃度需稀釋為為0.2ug/ul。相關服務:蛋白質圓二色譜分析
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遠紫外區的圓二色掃描圖譜反映的是蛋白質的肽鍵資訊,可以用於計算α螺旋、β摺疊、轉角和不規則捲曲等二級結構的比例;近紫外區的圓二色掃描圖譜反映的是蛋白質側鏈生色基團的排布資訊,如Trp、Phe、Tyr等殘基的排布資訊和二硫鍵微環境的變化。相關服務:蛋白質圓二色譜分析
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若不確定蛋白樣品的紫外吸收波長可以先掃個紫外全譜,然後根據最大吸收峰的波長來確定圓二色譜的波長,再掃圓二色全譜並根據最大紫外吸收峰波長進行微調。相關服務:蛋白質圓二色譜分析
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當然不會,蛋白質是基因表達的最終產物,但是與基因之間並沒有嚴格的線性關係,轉錄組水平也並不對應蛋白質水平,且基因組和轉錄組水平也看不出蛋白翻譯後修飾等現象。相關服務:蛋白質組學
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蛋白樣品上機獲得MS譜圖-利用搜庫軟體如MaxQuant等檢索質譜下機資料,獲得蛋白/肽段的初始資訊-進行可信度等質控分析-定性定量分析-資料註釋/挖掘等分析相關服務:蛋白質質譜鑑定
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